Funktionelle Charakterisierung des neuronal-vesikulären Carriers SLC10A4 und Etablierung eines Slc10a4-Knockout-Mausmodells

Viac o knihe

SLC10A4 wurde 2004 als neues Mitglied der SLC10-Familie identifiziert, zu der auch NTCP und ASBT gehören, die für den enterohepatischen Kreislauf der Gallensäuren verantwortlich sind. SLC10A4 zeigt die höchste Sequenzidentität zu NTCP und weist eine ähnliche Membrantopologie auf, ist jedoch ein neuronales Protein mit der höchsten Expression im Gehirn. Es wird in synaptischen Vesikeln cholinerger und monoaminerger Neurone sowie in Mastzellen exprimiert. Diese Arbeit untersucht die unbekannte Funktion von SLC10A4, wobei die Hypothese aufgestellt wird, dass es sich um einen Transporter für Neurotransmitter oder deren Intermediate handeln könnte. Verschiedene Neurotransmittertransporter wurden als Positivkontrollen in HEK293-Zellen und Xenopus laevis Oozyten kloniert. Transportmessungen mit radioaktiv-markierten Substraten ergaben, dass SLC10A4 keinen signifikant reproduzierbaren Transport für Neurotransmitter wie Dopamin und Serotonin zeigte. Auch die kürzlich berichtete Protease-aktivierbare Transportaktivität für Gallensäuren konnte nicht bestätigt werden. Überraschenderweise wurde eine verminderte ATP-Akkumulation in SLC10A4-HEK293-Zellen festgestellt, was weiterer Klärung bedarf. Zudem wurde ein Knockout-Mausmodell etabliert, um die physiologische Rolle von SLC10A4 zu untersuchen, wobei die Deletion des mSlc10a4-Gens auf DNA-, RNA- und Proteinebene bestätigt wurde.